Štiri glavne metode mikrobne analize vključujejo merjenje rasti, štetje mikrobov, fiziološki indeks in mikroskopijo brisa.
Merjenje rasti
Merjenje volumna: Status rasti mikroorganizmov se odraža z merjenjem količine hif v določenem volumnu gojišča. Ta metoda je preprosta in hitra, vendar je napaka velika.
Metoda suhe teže: Suha teža mikroorganizmov se določi s centrifugiranjem ali filtracijo. Ta metoda je bolj okorna in se običajno uporablja, kadar je mikrobni produkt bakterijska celica, kot je suhi kvas, krma itd.
Turbidimetrija: vrednost absorbance pri določeni valovni dolžini se meri z ultravijoličnim spektrofotometrom, da se določi status rasti mikroorganizmov. Ta metoda se uporablja predvsem za spremljanje rasti bakterij v fermentacijski industriji.
Merjenje dolžine micelija: Pri nitastih glivah in nekaterih aktinomicetah lahko na gojišču merimo dolžino rasti hif v določenem časovnem obdobju.
Metoda mikrobnega štetja
Metoda hemocitometra: preprosta, intuitivna in hitra, vendar primerna le za štetje spor, ki jih proizvajajo enocelični mikroorganizmi ali nitasti mikroorganizmi, rezultati pa vključujejo mrtve in žive bakterije23.
Metoda štetja obarvanja: uporabite barvila, kot so nevtralno rdeča, tripan modra in metil modra, da ločite mrtve celice od živih celic.
Metoda redčenja s tekočino: Izvedite desetkratno serijsko razredčitev neznanega bakterijskega vzorca, zabeležite število epruvet z rastjo pri vsaki razredčitvi po gojenju in nato izračunajte vsebnost živih bakterij na podlagi večkratnika redčenja vzorca. Ta metoda je bolj okorna, vendar je mogoče izračunati število živih bakterij.
Metoda štetja kolonij na plošči: razredčeno bakterijsko raztopino razporedite po trdnem gojišču kulture in izračunajte število bakterij v prvotni bakterijski raztopini po kulturi. S to metodo je mogoče pridobiti informacije o živih bakterijah, vendar je operacija okorna in zahteva določen čas kulture.
Fiziološka indikatorska metoda
Določanje vsebnosti dušika: Vsebnost dušika pri večini bakterij je 12,5 % suhe teže. Stanje rasti mikroorganizmov se lahko posredno odraža z merjenjem vsebnosti dušika.
Določanje vsebnosti ogljika: uporabite raztopino K2Cr2O7 za merjenje absorbance pri določeni valovni dolžini, narišite standardno krivuljo za izračun količine rasti.
Metoda določanja reducirajočega sladkorja: odraža stanje rasti mikroorganizmov z merjenjem količine reducirajočega sladkorja, ki se pogosto uporablja v obsežni industrijski fermentacijski proizvodnji.
Določanje drugih fizioloških snovi: Vključno z nukleinsko kislino, ATP in drugimi vsebnostmi, kot tudi proizvodnjo kisline, proizvodnjo plinov, porabo kisika, proizvodnjo toplote in druge indikatorje.
Mikroskopija brisov
Mikroskopija brisov je metoda za preiskavo bakterij, citologijo, encimske bakterije, mikrofilarije in holesterolne kristale. S pripravo brisov in njihovim opazovanjem pod mikroskopom je mogoče intuitivno razumeti morfologijo in strukturo mikroorganizmov
